Elisa试剂盒检测原理
Elisa生物检测是一种敏感度高,同时特异性强,重复性好的实验检测方法,由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
目前市面上的Elisa试剂盒检测原理主要有以下四种:直接法,间接法,夹心法,竞争法。
Elisa试剂盒评价标准:
① 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,应大于等于0.9900。
② 灵敏度:反应试剂盒的最低检测浓度
③ 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
④ 重复性:板内、板间变异系数
⑤ 回收率:判断实验的准确性和特异性
Elisa试剂盒的标准曲线:
标曲R值是几个9才合格?
实验室应按检测标准(方法)的要求使用标准溶液或标准物质建立标准曲线。所用标准溶液或标准物质应覆盖被测样品的浓度范围。检测标准(方法)如无具体的要求,至少使用5个标样(除空白外)建立线性标准曲线,每个点重复测定1-3次,对于筛选方法,线性回归方程的相关系数不应低于0.98,对于确证方法,相关系数不应低于0.99。
其实,大于0.99是判断是否为线性相关的一个标准,实际应用中线性大于0.999才是比较理想的。线性在0.99到0.999之间的监测结果只用接近最高浓度一半(中间浓度)的位置才比较准确,如果线性大于0.999的话,在整个线性范围内都会有一个比较满意的结果。
如果检测的线性不好,可以减少标准的覆盖范围,将标准的浓度调整到待测样品浓度附近,这样结果也是非常准确的。例如,样品的浓度约20ppb,但在0~50ppb范围建立标准曲线,但线性非常不理想,这时可以将标准范围调整到15~25ppb之间,作五个标准。
可以检测检测各类食品,饲料,组织及生物液体中真菌毒素、抗生素、食品添加剂以及其他细菌蛋白的ELISA试剂盒:
1.抗生素类:氨苄青霉素,货号:E4350,样本:血清,尿液,牛奶,组织
检测食品中抗生素的残留
样本类型:组织、血清、牛奶、鸡蛋和其他生物样本
真菌毒素是真菌产生的低分子量次级代谢产物
2.真菌毒素:总黄曲霉毒素,货号:E4747,样本:酒、酱油、醋、谷物、花生、配方饲料、食用油
样品类型:玉米、谷物、花生、大米、大豆等。
食品受到生物和环境污染物的污染发生在生产和加工的几个阶段
3.食品添加剂: 沙丁胺醇,货号:K4209,样本:猪尿、组织、饲料
样品类型:牛奶、肉类、玉米、谷物、花生、大米、大豆,等。
表达蛋白经过几个纯化步骤后,宿主细胞蛋白仍然可以以较高浓度存在,甚至会与原料药一起纯化和浓缩;样品类型:细胞裂解液、其他生物液
4.宿主细胞蛋白:CHO 宿主细胞蛋白,货号:E4537,样本:细胞裂解液,其他生物液体
5.其他毒素:双酚A(BPA),E4722,样本:细胞裂解液,其他生物液体
文章来源:每日生物评论
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