艾迪基因联合华南农业大学开发基于CRISPR的检测羊奶粉掺假方法

　　近年来，羊奶市场规模不断上升，开发了品种繁多的羊奶产品，其中羊奶粉是市场份额最大的产品。在原料中掺入牛乳成分是最常见的方式，因为牛乳成分相似，成本低，而且容易获得。近年来，在羊奶及其乳制品的多次抽样调查中发现掺假现象。掺假不仅侵犯了消费者的利益，而且还可能引起食物过敏。因此，开发一种快速检测羊奶粉掺假的方法十分重要。

　　华南农业大学的沈兴课题组联合艾迪基因在《Foods》上发表了题为“A Rapid RPA-CRISPR/Cas12a Detection Method for Adulteration of Goat Milk Powder”的文章，影响因子5.561，该研究建立了一种快速的RPA-CRISPR/Cas12a定性检测牛源性成分掺假羊奶粉的方法。

　　本研究采用CRISPR/Cas12a检测系统结合重组酶聚合酶扩增(RPA)技术对羊奶粉中牛源性成分的掺假进行定性检测。设计筛选特异性引物和crRNA。在对RPA和Cas体系进行优化后，建立了RPA- crispr /Cas12a检测方法。该检测无需大型设备辅助，可在45分钟内完成牛源性成分的快速鉴定。

　　RPA-CRISPR/Cas12a法对牛基因组DNA的绝对检出率可达10?2 ng/μL，对牛奶粉的绝对检出率可达1% (w/w)，可满足现场检测的检测要求。

　　真实样品检测：共收集55种市售羊奶粉产品进行盲测。结果显示，27.3%的样品中掺入了牛成分，显示出羊奶粉市场掺假情况严重。

　　总结：

　　本研究建立了一种快速的RPA-CRISPR/Cas12a定性检测牛源性成分掺假羊奶粉的方法。该方法的检出限能很好地满足食品监测的要求，同时保持了较高的特异性。通过对55种市售山羊奶粉产品的小范围调查，发现目前山羊奶粉掺假情况严重。因此，本研究建立的RPA-CRISPR/Cas12a检测方法非常适合用于羊奶中牛源性成分的现场快速检测，可为打击掺假羊奶食品造假提供可靠的技术参考。

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