淀粉含量检测试剂盒（蒽酮比色法）

　　【Boxbio】淀粉含量检测试剂盒（货号：AKSU015）

　　淀粉是由葡萄糖分子聚合而成的天然高分子化合物，是细胞中碳水化合物的主要储藏形式，在食品加工、微生物发酵、酿造、纺织和制药等领域具有广泛应用，其含量测定对生物体内糖代谢分析和食品营养价值评价具有重要意义。

　　使用洗脱液将样品中可溶性糖与淀粉分开，淀粉经酸水解为葡萄糖，能够与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，产物在620 nm处具有特征吸收峰，通过吸光值变化即可定量检测淀粉的含量。

　　淀粉试剂盒检测原理

　　需自备试剂：浓硫酸（HSO，MW = 98.08，CAS: 7664-93-9）

　　

　　测定过程中所需要的仪器和试剂：可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、可调式移液器、台式离心机、恒温水浴、浓硫酸和蒸馏水。

　　1.淀粉的提取（可根据预实验结果适当调整样本量）

　　①称取约0.1 g样品于离心管中使用研磨杵充分研磨（或研钵中研碎），加入1 mL洗脱液，充分匀浆，80℃水浴提取30 min，3000 g常温离心5 min，弃上清，留沉淀；

　　②沉淀中加入500 μL蒸馏水，95℃水浴糊化15 min（密封以防止水分散失）；

　　③冷却后，加入350 μL提取液，常温提取15 min，振荡3-5次；

　　④加入850 μL蒸馏水混匀，3000 g常温离心10 min，取上清液；

　　⑤取上清液100 μL加入700 μL蒸馏水（8倍稀释）后即为待测样本。

　　（注：若稀释8倍后样品吸光值大于1.0或小于0.1，建议将样品再适当稀释或浓缩后再进行测量）

　　2.测定步骤

　　①分光光度计预热30 min以上，调节波长至620 nm，蒸馏水调零。

　　②在离心管中依次加入下列试剂：

　　

　　吸光值测定：反应结束后自然冷却至室温，测定620 nm处吸光度值，记为A测定，A标准，A空白；计算A测定=A测定-A空白，A标准=A标准-A空白。注：空白管只需测定1-2次。

　　标准曲线的建立：以0.1、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01 mg/mL为横坐标（x），对应的ΔA标准为纵坐标（y），绘制标准曲线，得到线性回归方程y=kx+b，将ΔA测定代入方程得到x（mg/mL）。

　　注意事项

　　①若测定吸光值超出标准线性检测范围，建议增加样品稀释倍数或增加样本量后再进行测定，计算时相应调整；

　　②若样本为淀粉含量较高的干样，可适当减小样品量以保证充分提取，如称取0.01 g-0.02 g干样，加入1 mL洗脱液再进行提取，且上清液可能需要稀释50-100倍；

　　③浓硫酸具有强腐蚀性，请谨慎操作；

　　④为保证结果准确且避免试剂损失，测定前请仔细阅读说明书（以实际收到说明书内容为准），确认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定，过程中问题请您及时与工作人员联系。

　　For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

　　举报/反馈