肿瘤标志物检测结果互认的前提是质量啊！有哪些常见影响因素与质控要点？ ｜ 专论

　　肿瘤标志物（Tumor Marker TM）在临床广泛应用已有30多年的历史，在肿瘤诊断、疗效评估、复发监测及预后判断等方面发挥着重要作用，已成为不可缺或的临床诊治手段之一。随着临床应用的不断深入，检测方法的不断改进，新项目的不断推出，在肿瘤标志物的实际应用中发现许多与临床病情和症状不符的情况，常常受到临床医生的质疑，需要更多的诊疗手段进一步验证。现根据行业标准、相关指南及在临床工作中发现的问题，结合文献报道资料，对肿瘤标志物在检测中的影响因素进行阐述,以供商榷。

　　01、样本状况对TM检测结果的影响

　　1.标本溶血对TM检测结果的影响：标本溶血对许多检测结果有影响。在TM项目中也同样存在，如溶血可使神经元特异性烯醇化酶（NSE）结果升高，使α-L岩藻糖苷酶（AFU）结果偏低。因红细胞和血小板胞内存在神经元特异性烯醇化酶（NSE），标本溶血可使细胞膜破裂NSE释放到胞外，血液中NSE浓度增高。因此，血液标本在采集时尽量顺畅，送检时避免震荡，接收后及时离心，尽快检测。

　　2.标本储存对TM检测结果的影响：标本离心后应及时检测，如不能及时检测，应保存于4℃冰箱中，24h内有效，当天不能检测的标本储存于-20℃冰箱内保存；如须长期贮存的标本应在-70℃冰箱中保存，复融时请注意温度，避免反复冻融，避免热处理，以防蛋白质变性，造成结果偏低。酶类和激素类TM不稳定，易降解，应及时检测或离心分离血清后低温保存。此外，采样管内的促凝剂可干扰某些TM的结果[1]。

　　3.标本污染对TM检测结果的影响：呼吸道分泌物、唾液、汗液、皮肤屑等污染标本可使鳞状细胞癌抗原（SCC）和癌胚抗原（CEA）检测值变高。大多数TM为蛋白质，可被蛋白酶和神经胺酶分解，故标本应避免微生物污染。

　　02、生物学因素对TM检测结果的影响

　　1.不同性别和年龄对TM水平的影响：多种TM在不同性别和年龄人群中所测的结果有所不同。人附睾蛋白4(HE4)中国人群参考值多中心研究结果显示[2]，中国表观健康女性人群的总体参考值与西方表观健康女性HE4水平略有差异。随年龄的增长，HE4随之升高，绝经也是影响HE4的一个主要因素。男性前列腺特异性抗原（PSA）随着年龄的增长而升高，糖类抗原199（CA199）、糖类抗原153（CA153）、CEA等也可能升高。研究结果表明，60~99岁健康个体中至少有40%的个体CA199、CEA、糖类抗原724（CA724）、CA153、甲胎蛋白（AFP）和PSA出现一项升高。铁蛋白男性高于女性，绝经后妇女可逐渐升高。因此，应建立不同性别、不同年龄段的参考区间。

　　2.生理状况和良性疾病对TM检测结果的影响：部分妇女在月经期CA125和CA199可升高。妊娠期的甲胎蛋白（AFP）和糖类抗原-125（CA125）等明显升高，CEA可轻度升高。CA199、CA125升高还见于女性生殖系统疾病，如子宫内膜异位症、卵巢囊肿、畸胎瘤、子宫肌瘤、卵巢皮样囊肿、卵巢黏液囊肿等[3-5]。长期抽烟者CEA、CA19-9可能升高。肝功能异常、胆石症、胆汁淤滞等均可造成CA199、CEA等升高。慢性肝炎、肝硬化AFP可升高。肾病综合征、肾功能不全时，胃泌素释放肽前体）（ProGRP）、细胞角蛋白 19 片段（CYFRA21-1）、SCC、β2-微球蛋白（β2-MG）、CA125可升高[6]。脑部外伤、脑部疾病患者脑脊液（CSF）中可出现神经元特异性烯醇化酶（NSE）升高。皮肤湿疹、银屑病、红皮病等可出现SCC升高[7-10]。患者随着年龄的增长、病程的延长、糖化血红蛋白水平的增加，CEA、CA19-9水平随之升高[11-12]。良性疾病如结核、心肌炎引发的心包积液、多浆膜腔积液中CA125明显升高[10]。系统性红斑狼疮（SLE）合并感染、肺间质病变及肝功能异常者血清CA125、CA19-9、CEA、AFP及CA153也可出现异常[13]。原发性干燥综合征患者病情活动明显时血清CA125水平升高[14]。矽肺患者血清CA125、CA19-9水平升高[15]。某些发热性疾病，如家族性地中海热可出现CA724升高[16]。发热伴咳嗽可使SCC升高。男性前列腺增生肥大时PSA可升高。

　　03、诊疗措施对TM检测结果的影响

　　肛门指诊、前列腺穿刺、前列腺按摩、导尿和直肠镜检查后，血液中前列腺特异性抗原（PSA）和前列腺酸性磷酸酶（PAP）可出现升高，建议2周后再复检。急性尿潴留、前列腺炎也可使PSA升高[17]。乳房触诊可引起某些人泌乳素升高，与触发下丘脑-垂体-性腺轴有关，1周后复检可与垂体瘤鉴别。

　　04、药物对TM检测结果影响

　　许多营养品可能造成TM异常，如灵芝孢子粉、螺旋藻片、金蝉花等使CA724、CA19-9升高，但有个体差异，应注意甄别。痛风患者服用秋水仙碱、非甾体类药物可引起CA724升高，且与药物的剂量有一定的相关性，可能与秋水仙碱引起的急性胃肠道不良反应有关[18]。抗雄性激素治疗前列腺癌时可抑制PSA产生，导致检测结果偏低。某些抗肿瘤药如丝裂霉素、顺珀等可导致PSA假性升高；化疗初始可引起TM一过性增高，如细胞毒药物（如5-氟尿嘧啶）治疗肿瘤时，可使CEA升高，可能的原因是药物杀死肿瘤细胞后，细胞裂解释放出相关TM物质，导致外周血TM浓度升高[1]，治疗有效时可逐渐下降。单克隆抗体或某些免疫治疗如DC-CIK、CAR-T等治疗的患者，TM可能会出现假性升高。对于因药物引起的TM检测结果异常，建议停药后随访，动态监测。

　　05、被检物浓度及嗜异性抗体对TM检测结果的影响

　　1.“钩状效应”对TM检测结果的影响：抗原与抗体的特异性结合反应，受抗原抗体的性质、活性、效价、反应比例及环境（如电解质，pH值，温度）等多因素影响。当检测高浓度样本时，常会出现“钩状效应”，使检测结果偏低。要消除这种干扰，可对样本进行适当稀释后复检。

　　2.携带污染：当测定高浓度标本时，携带污染成为导致假阳性的潜在问题。特别是紧随在高浓度标本后的标本，若出现偏高结果时，应复查以排除携带污染。目前，许多自动化流水线检测仪器无法确认其前一标本是否高值，故审核时应注意检测结果的历史回顾或查阅诊疗状况，减少错误报告。

　　3.嗜异性抗体对检测结果的影响：在健康人群中约3%～15%的人体内含嗜异性抗体（HAMA）[19]，可与免疫球蛋白的Fc和Fab表位结合，而不与抗原结合位点结合，虽其亲和力较弱但嗜异性抗体（尤其是人抗鼠抗体）的存在可在两种鼠单克隆抗体间起“桥梁”作用，导致TM浓度假性增高。对于有动物密接者或有被动物咬伤史者应尤为注意。处理方法可在样本中先加入中和抗体，如提纯的鼠 IgG或聚乙二醇( PEG) 以沉淀样本中的异嗜性抗体，可减少干扰。还可以采用标本倍比稀释后再检测，如结果不升反降，可能有嗜异性抗体存在，也是一种初筛手段，适合基层医院实验室应用。

　　06、不同检测平台对TM检测结果的影响

　　目前TM的测定方法多样，试剂良莠不济，关键问题是除少数项目如AFP、CEA、PSA、HCG外，其他均没有国际标准品，尤其是糖类抗原类，不同的厂家使用的单克隆抗体针对抗原的位点不同，又缺乏统一的抗原成分、校正品和参考方法，无法标准化，常常导致检测结果相差甚远，这给TM测定的质量控制和标准化带来了困难。因此在对患者进行连续监测中要特别注意，应尽量在同一实验室使用同一方法、同一仪器和同一厂家试剂盒进行测定，避免因分析系统不同而产生误差，影响疗效的判断。同时实验室也要严格执行室内质控标准，积极参加室间质评。 

　　综上所述，TM检测在目前难以达到标准化和规范化的现状下，检验人员除严格执行操作规程，加强质量管理外，还应了解影响TM检测的各种因素，探索解决问题的方法，发现结果与临床不符时，应及时与临床医生和患者沟通，了解患者的诊疗历史和生活方式，不断积累经验，尽量避免错误报告，使TM在肿瘤的诊治中发挥更好的作用。 

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　　编辑 | 丁梦菲 蔡懿培

　　原文以《临床肿瘤标志物检测中常见影响因素与质量控制要点》为题发表在《临床实验室》杂志2022年6月刊专题“恶性肿瘤实验室诊断”专论版块