高危行为后,你采用的艾滋病检测方法靠谱吗?
艾滋病检测方法概述
艾滋病通常不以单纯的某一症状作为诊断感染的依据,而是结合高危行为接触史和实验室检测结果进行诊断。常用的艾滋病相关的实验室检测包括HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测和CD4细胞计数等。HIV抗体检测是HIV感染诊断最常见的方法。核酸检测中病毒载量测定和CD4细胞计数是判断疾病进展和治疗时机、评价疗效和预后的两项重要指标。
第一轮恐艾症人群干预服务志愿者培训
下面我们来看看具体的方法介绍:
1、HIV筛查试验
1)酶联免疫吸附试验(ELISA)
该试验可使用血液(包含血清、血浆和滤纸干血斑)、尿液样品进行检测,ELISA多为HIV抗体检测试剂。该试剂HIV抗原包被于固相载体,加入待测样品和酶标记的抗体,加入底物显色,用酶标仪测定结果,与试剂盒的质控组对照进行结果的判定。
2)化学发光或免疫荧光试验(CIA/IFA)
这类试验采用发光或荧光底物,可使用血液(包含血清和血浆)、尿液样品,既可检测抗体,也可联合检测p24抗原,HIV第四代检测试剂为同时检测抗体和抗原的试剂,第四代检测试剂常用化学发光法,由于P24抗原产生于HIV感染早期,因此第四代试剂会比第三代试剂的窗口期提前,能够发现尚未产生抗体的急性期感染者。该试剂的HIV抗原/抗体包被于固相载体,加入待检样品和酶或荧光标记的HIV抗原/抗体,加发光或荧光底物,用发光仪或荧光仪测定结果,与试剂盒的质控组对照进行结果的判定。
3)HIV快速检测(RT)
RT可以使用血液、口腔黏膜渗出液样品,是一种检测时间短(一般15-30分钟内可以出结果),不需要其他辅助设备便可以完成的检测方法。包括免疫渗透试验,免疫层析试验,明胶颗粒凝集试验(PA)。
免疫渗滤试验:包括斑点ELISA和斑点免疫胶体金。HIV抗原点状或线状固定在包膜上,加待检样品,利用微孔滤膜的可滤过性使抗原抗体发生结合反应,若待测样品中有HIV抗体则会从而膜上抗原部位显示出有色斑点或条带,反应时间在10分钟以内。有效试验的质控点必须显色。
实验室里的艾滋病检测条件非常严苛
2、HIV抗体确证试验
由于初筛试剂的高敏感性及相对弱的特异性,使初筛检测结果会出现假阳性,某些疾病的干扰也会造成假阳性结果的出现,如患免疫系统疾病或怀孕等都有可能出现假阳性,需要进一步通过确证试验才能最终判定是否感染HIV。确证试验也是一种抗体检测方法,常用免疫印迹试验(WB),可使用血清、血浆和滤纸干血斑样品。该试剂的包膜上含有HIV的各类特异性抗原,包括膜区抗原gp160、gp120和gp41,核心抗原p55、p24和p17,聚合酶抗原p66、p51和p31,另外还有HIV-2型特异性抗原,待测样品中若含有HIV抗体,就会与膜条上抗原带相结合,加入抗人-IgG酶结合物和底物后,根据出现条带情况, 按照试剂盒说明书判定标准,判断待测样品为阳性、阴性或不确定。
3、HIV核酸检测
HIV核酸检测分为核酸定性检测和核酸定量检测(也就是我们常说的HIV病毒载量检测)。直接检测血液中是否存在病毒核酸,诊断有无病原体感染,HIV核酸检测一般作为诊断HIV的辅助性检测手段。
1) HIV核酸定性检测
可以使用血浆、血清、组织器官或血液制品等用于检测HIV的RNA和DNA。国内生产的用于核酸检测试剂主要为Taqman实时荧光PCR检测试剂,检测原理为Taqman实时荧光PCR扩增检测,检测靶基因为多聚酶区整合酶基因。检测结果显示“有反应”或“检测到”,报告本次实验核酸阳性;检测结果显示“无反应”或“未检测到”,报告本次实验核酸阴性。核酸定性检测还需结合流行病学史、临床病史和实验室其他相关指标进行综合判断。
2)HIV核酸定量检测
HIV核酸定量检测原理主要基于靶核酸扩增RT-PCR和信号放大扩增两种方法。我国实验室常用国内外生产的实时荧光定量RT-PCR靶核酸扩增试剂(荧光探针法)。测定每毫升中病毒的拷贝数量(CPs/ml)。检测值>5000 CPs/ml,报告检测值;检测值≤5000 CPs/ml,尽快再次严格按核酸检测的要求采样检测,报告检测值,结果>5000CPs/ml,报告检测值,结果仍≤5000 CPs/ml,则需充分结合流行病学史、临床病史、CD4+T淋巴细胞计数和HIV抗体随访检测结果等进行综合判断。不同时间的两次定量检测有助于准确判断结果。
全国首次恐艾干预志愿者培训现场
不同的检测方法适用于不同的情况,
不同的检测方法窗口期各有不同,
高危行为接触后不同的时间间隔,
不同的高危行为接触方式,
都会有不同的检测策略。
具体问题具体分析,是求真的本源。
因此,如果发生了高危行为,一定要结合自己的实际情况向专业人员进行咨询,采取适宜自己的检测策略,排除风险,调整不安情绪。
作者:成都市恐艾干预中心刘老师
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