核酸检测的原理是什么？

　　新冠肺炎疫情发生以来，核酸检测阳性是新冠肺炎确诊的重要标准，而所谓的“新冠病毒核酸检测阳性”，其检测原理又是什么呢？

　　首先我们需要了解核酸检测的定义：即检测被测者体内是否含有新冠病毒的核糖核苷酸（RNA）。由于新冠病毒的核酸内部所含的核酸数量和排列顺序与其他病毒不一样，这使得新冠病毒相较其他病毒具有特异性，所以能被有效识别和检出。

　　

　　核酸检测的原理为聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR），这是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，这时候大家是不是又有疑问，前面不是说新冠病毒是RNA病毒吗？怎么复制DNA呢？其实在新冠检测过程中，并不能简单的复制病毒RNA。新冠病毒核酸检测实际采用的技术是逆转录-聚合酶链式反应?(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR)，即逆转录PCR，这种技术是聚合酶链式反应（PCR）的一种广泛应用的变形。

　　其主要过程为：先将新冠病毒的核酸（RNA）逆转录为对应的互补单链脱氧核糖核酸（cDNA）；再以此为模板通过PCR进行DNA扩增，同时，使用标记有荧光的特异性探针对扩增得到的DNA进行标记并检测，如果存在新冠病毒核酸，原本样本中微量的病毒经过指数级扩增至巨大的数量，扩增仪就可检测到相应的荧光信号，并且，随着DNA的不断复制，荧光信号不断增强，就可以间接检测到了新冠病毒RNA的存在。

　　

　　总的来说，新冠病毒核酸检测可总结为样本采集—RNA提取—RNA逆转录成cDNA--荧光定量PCR技术（病毒基因组检测）。

　　撰稿：徐幸

　　

　　徐幸

　　上海市临床检验中心

　　临床细胞分子遗传学研究室/分子病理研究室? 检验技师

　　主要从事医疗机构临床实验室分子诊断技术质量管理相关工作

　　来源：上海市临床检验中心

　　编辑：弋水 |?校对：Miley?| 责编：木霖森

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