一种药物组合物在治疗桥本氏甲状腺炎的药物中的新用途

　　1.本发明属于中医药领域，具体涉及一种药物组合物在治疗桥本氏甲状腺炎的药物中的新用途。背景技术：2.桥本氏甲状腺炎(hashimoto thyroiditis)又称桥本氏病、桥本氏甲状腺肿、淋巴瘤性甲状腺肿、淋巴细胞甲状腺炎，为甲状腺的一种局性自身免疫病。桥本氏甲状腺炎发展缓慢，早期无症状，但后期会表现为甲状腺肿大和弥漫性破坏性炎性病变，甲状腺上皮不断被破坏和再生，当出现甲状腺肿时，平均病程已达2～4年，常见全身乏力、咽喉不适的症状，10～20％患者有局部压迫感或甲状腺区隐痛，且有25％的病人会表现出甲亢或甲减，且趋于出现甲减。其最终结果是抗线粒体、甲状腺球蛋白和其它甲状腺特异性抗原的抗体滴度升高(例如最具有代表性的tpoab、tgab抗体滴度升高)，甲状腺组织为淋巴细胞所浸润，导致甲状腺功能逐步破坏。除了对甲状腺本身功能的破坏外，相关研究还发现，桥本氏甲状腺炎易导致下丘脑-垂体-卵巢生殖轴异常，引起女性排卵功能障碍、不孕及流产等女性生殖疾病，约占女性不孕疾病病因的25％。因此育龄期女性自身免疫性甲状腺炎患者出现月经失调、不孕等生殖疾病的风险明显高于甲状腺抗体正常的育龄期女性，因此还严重威胁到女性生殖健康问题。3.目前，对于桥本氏甲状腺炎的治疗尚未有统一标准，但对于出现甲状腺肿大、有压迫症状、伴发亚临床甲减或有甲减表现者，需要用甲状腺片替代治疗，治疗周期长，且不适于老年或有心血管疾病的患者使用。糖皮质激素虽然可减轻甲状腺肿大，并降低血中抗甲状腺抗体的浓度，但存在较多的副作用。4.中医药在疾病的治疗中展现出毒副作用小等独特的优势，因而研究更多可用于治疗桥本氏甲状腺炎的中药组合物具有非常重要的意义。榆栀止血颗粒是清热凉血、调经止痛的妇科常用的治疗血热证的月经不调的中成药，其药物组成包括地榆、墨旱莲、栀子、仙鹤草、槐花、拳参、茜草、蒲黄、生地黄、白芍、黄芩、当归、牡丹皮、绵马贯众、大蓟、侧柏叶，主要功效为固经止血，滋阴清热，用于冲任不固、阴虚血热所致月经过多、经期延长。然而，榆栀止血颗粒对桥本氏甲状腺炎，及其合并的女性生殖功能疾病的作用目前还未见报道。技术实现要素：5.本发明的目的在于提供一种能够治疗桥本氏甲状腺炎及其并发的女性生殖功能疾病的中药组合物。6.本发明提供了榆栀止血颗粒在制备治疗桥本氏甲状腺炎及其并发症的药物中的用途。7.进一步地，上述治疗桥本氏甲状腺炎的药物是治疗气郁质体质、阳虚质体质或血瘀质体质桥本氏甲状腺炎的药物。8.进一步地，上述治疗桥本氏甲状腺炎的药物是治疗肝郁型桥本氏甲状腺炎的药物。9.更进一步地，上述治疗桥本氏甲状腺炎的药物是降低tpoab和/或tgab抗体滴度的药物。10.更进一步地，上述疗桥本氏甲状腺炎的药物是降低促炎性细胞因子的药物。11.优选地，上述促炎性细胞因子是il-2、il-8和/或vegf。12.更进一步地，上述治疗桥本氏甲状腺炎的药物是降低甲状腺淋巴细胞浸润强度和/或改善甲状腺滤泡结构的药物。13.进一步地，上述治疗桥本氏甲状腺炎并发症的药物是治疗桥本氏甲状腺炎引起的女性生殖疾病的药物，优选为治疗月经不调、不孕、流产的药物。14.更进一步地，上述治疗桥本氏甲状腺炎引起的女性生殖疾病的药物是提高血清生殖激素含量的药物；优选地，所述生殖激素包括孕酮、雌二酮、抗缪勒管激素。15.更进一步地，上述治疗桥本氏甲状腺炎引起的女性生殖疾病的药物是提高卵巢卵泡、黄体数和/或改善子宫内膜厚度和腺体大小的药物。16.本发明的有益效果：榆栀止血颗粒可有效降低气郁质女性桥本氏甲状腺炎患者的tpoab、tgab抗体滴度及气郁质分数，可下调促炎因子(il-2、il-8、vegf)水平，显著减轻甲状腺组织炎症反应，进一步抑制炎症反应对子宫功能的损害，改善桥本氏甲状腺炎并发的生殖功能障碍，在制备治疗桥本氏甲状腺炎及其并发症的药物中具有潜在应用价值。17.显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。18.以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。附图说明19.图1为各组小鼠甲状腺组织切片染色结果。20.图2为各组小鼠卵泡和黄体情况。21.图3为各组小鼠子宫组织切片染色结果。具体实施方式22.除另有说明外，本发明所用原料与设备均为已知产品，通过购买市售产品所得。23.本发明实验药物：榆栀止血颗粒由山东新时代药业有限公司生产，国药准字z20130019，产品批号：1471908001。成分包括：地榆、墨旱莲、栀子、仙鹤草、槐花、拳参、茜草、蒲黄、生地黄、白芍、黄芩、当归、牡丹皮、绵马贯众、大蓟、侧柏叶。左甲状腺素钠片(优甲乐)，merck serono公司生产，规格:50ug*100片/盒，产品批号：600q98，600m0t。24.实验动物：25.spf级昆明雄雌性小鼠分别为15只，90只；雌性小鼠采用8～9龄，体质量(33±2)g；雄性小鼠采用6-8周龄，体质量(31±2)g，均购于成都达硕实验动物有限公司【许可证号：scxk(川)2020030】)；饲养环境位于成都中医药大学妇科实验室，通风良好，按照雌性小鼠6只/笼、雄性小鼠1只/笼进行分笼饲养，自由摄食饮水，温度保持在20～24℃，相对湿度40％～70％。26.以下通过实验例证明本发明的有益效果。27.实验例1、榆栀止血颗粒对桥本氏甲状腺炎小鼠的治疗28.1、实验方法29.1.1实验试剂配制30.1.1.1高碘水配制31.将0.64g的碘化钠晶体溶于1l纯净水后，进行充分混合，配制成0.64g/l浓度的高碘水。32.1.1.2抗原溶液配制33.将猪甲状腺球蛋白(ptg)抗原与磷酸盐缓冲液按1:1混和，配成浓度为1mg/ml的抗原溶液。34.1.1.3初次/加强免疫乳化剂配制35.将弗氏完全佐剂(cfa)或弗氏不完全佐剂(ifa)与配制好的抗原溶液按照1:1的比例分别吸入离心管中，再将离心管置于旋涡振荡器上以每分钟2000转的速度高速振荡40分钟左右，以便两种溶液充分混和，直到形成浓度为500mg/l的粘稠的油包水状的初次/加强免疫乳化剂，现配现用。36.1.2实验动物分组及造模37.1.2.1实验动物分组38.所有8-9周龄的spf级昆明雌性小鼠适应性喂养1周后，筛选出90只动情周期正常的小鼠纳入实验，随机分为对照组、模型组及榆栀止血颗粒组，再将3组根据取材动情周期时间分为动情前后期及动情期，每组各3个亚组，共9个亚组，10只/亚组。39.1.2.2造模方法40.1.2.2.1模型组及榆栀药物组建立桥本氏甲状腺炎动物模型方法41.将制备好的ptg抗原溶液与佐剂按1:1充分振荡混和至终浓度为500mg/l的粘稠乳化剂，置4℃冰箱备用。第1～2周进行初次免疫，于小鼠于皮下(颈部、背部、大腿内侧、腹部等)多点注射含ptg完全弗氏佐剂抗原共0.2ml，连续2周，每周2次(周一、周四早上9点开始)；第3～11周每只小鼠皮下注射0.2ml的ptg不完全弗氏佐剂抗原溶液，2次/周(时间、方法同前)，连续9周；同时造模第1周开始模型组及榆栀止血颗粒组小鼠予以0.64g·l-1高碘水喂养。42.1.2.2.2对照组43.对照组按等量pbs缓冲液(0.2ml)对小鼠皮下(颈部、背部、大腿内侧、腹部等)进行多点皮下注射(注射时间及周期同前)，同时予以蒸馏水饮用。44.1.3给药45.榆栀止血颗粒10g/袋，人临床用量1次1袋，1日3次，按平均体重50kg计算，即0.0006g/g。同时按照体表面积换算法[31]，小鼠与人的换算系数为9.1，小鼠用药计量0.005g/g，每只小鼠(体重40g)每天需要灌胃的榆栀止血颗粒剂量为0.2g/只。于造模第8周开始榆栀止血颗粒组进行榆栀止血颗粒悬溶液灌胃，0.3ml/只，1日1次，连续给药4周；对照组及模型组按等体积的生理盐水进行灌胃，时间同前。[0046]1.4实验取材[0047]由于造模结束后并未采用促排进行统一周期取材，通过阴道涂片将处于动情间期和动情后期的小鼠进行处死取材，动情期小鼠合笼观察子代情况。在进行阴道涂片选取周期处死小鼠过程中，动情后期小鼠先满足所需取材只数(对照组10只，模型组及榆栀药物组各9只)，故将动情后期小鼠的标本进行检测后，进行统计分析。[0048]1.4.1标本采集前准备[0049]干预结束后，取材前一天禁食不禁水，取材当日通过阴道涂片选取动情前期、动情后期小鼠，称量每只小鼠的禁食体重及肛温。[0050]1.4.2血液样本采集及处理[0051]所有需取材的雌性小鼠采用配制好的4％浓度的水合氯醛，通过腹腔注射麻醉，操作过程中应避开内脏及血管，待小鼠无明显痛觉后，减掉小鼠胡须，采用眼眶静脉丛采血方法，将血液标本收集到2mlpcr管中后，再将收集好的血液样本全部静置于4℃冰箱中24h，使用设置为转速3000r/min的离心机离心所有血液样本10min，最后将分离出的血清、血浆分别移至标记好的冻存管，置于-80℃冰箱冷冻备检。[0052]1.4.3组织标本采集及处理[0053]脱颈椎法处死小鼠后，将小鼠仰卧位固定于冰上，酒精消毒小鼠颈部，分离气管并剥离甲状腺，去除筋膜和结蹄组织，将甲状腺组织置于4％多聚甲醛固定液中，避光保存，备用于甲状腺组织he染色检查。消毒小鼠腹部区域，沿下腹中线用组织剪剪开小鼠皮肤后，分别用止血钳固定，充分暴露视野，沿着阴道口向上找到小鼠y型子宫，顺沿子宫的两个角向上找到左右两侧卵巢，用眼科镊和组织镊小心剥离子宫及卵巢周围脂肪组织，摘取小鼠子宫及卵巢；将左侧子宫及卵巢存放于4％多聚甲醛固定液中，避光保存，备检；右侧子宫及卵巢置于冻存管内，放入液氮中保存待检。[0054]1.5合笼情况[0055]造模结束后，3组昆明雌性小鼠均通过阴道涂片检查，筛选出10只处于动情期的雌性小鼠，雌鼠与雄鼠合笼只数比例为2:1，于晚上8点进行，12小时后(次日早晨8点)观察各笼小鼠阴栓情况，如发现雌性小鼠阴道口出现阴栓即代表交配成功，将其放置于其他笼中饲养并进行标记，待各组子代小鼠出生后进行计数产仔数及观察记录其存活情况。[0056]1.6观察指标[0057]1.6.1小鼠一般情况观察[0058]造模期间观察并记录各组小鼠在实验饲养过程中存活情况、体重、进食、摄水、排尿、排便、皮毛(有无立毛、脱毛)、精神状态等。若小鼠出现死亡，需记录其死亡日期及死亡原因，同时每周五早上9点测量小鼠肛温并记录。[0059]1.6.2小鼠动情周期观察及操作方法[0060]本实验中所有小鼠采用固定时间点进行阴道脱落细胞学检查，具体操作方法如下：捏住小鼠背部皮肤，固定住小鼠后充分暴露尾部视野，待医疗专用尖头小棉签被生理盐水浸湿后，轻轻地插入小鼠阴道约0.5cm，尖头小棉签固定朝同一个方向旋转3-4周，抽出尖头小棉签，将尖头小棉签的阴道脱落物由左至右均匀涂抹于玻片上(切勿重叠)，将玻片放置于coic显微(10*10倍)光镜下观察细胞形态以判断动情周期变化。正常的性成熟雌性小鼠一般4-5天为一个完整的动情周期，具体分期及特点，见表10。动情周期＞6天，则认为周期过长；动情周期＜4天则认为动情周期不整或过短；若长时间处于同一周期≥3天认为周期素乱。[0061]表1阴道脱落细胞特征[0062][0063]1.6.3甲状腺、卵巢及子宫组织学观察[0064](1)包埋方法及步骤：1)置于不同浓度的酒精中按照浓度由低到高的顺序依次进行脱水，脱水时间依次递增；2)依次经过二甲苯ⅰ、ⅱ、ⅲ溶液各20分钟进行透明处理；3)置于不同温度石蜡进行浸蜡处理，最后包埋于石蜡中，备用。[0065](2)切片方法及步骤：将包埋好的组织蜡块切成5μm薄片，采用漂烘仪进行裱片。[0066](3)染色方法及步骤：1)按照先后顺序置于二甲苯ⅰ、ⅱ溶液中，每次需浸泡10分钟；2)依次置于由高到低浓度的乙醇溶液中各浸泡2分钟；3)烘干；4)温水浸泡，冲洗；5)苏木素对冲洗好的组织进行染色；6)再次冲洗；7)1％盐酸酒精分化20s；8)置于50℃温水中5分钟左右，待出现蓝色后捞出，自来水及蒸馏水各冲洗1次；9)伊红染色，冲洗，再经由低到高浓度的顺序将切片置于不同浓度的酒精中依次脱水处理，再采用二甲苯透明处理，最后采用加拿大树胶封固。[0067](4)镜检：采用显微镜摄像系统在甲状腺、卵巢及子宫病理切片组织中随机选择1个视野，应用ccd仪器设备观察并采集所需高质量的图像。甲状腺组织采集200倍图片，根据charveire分类法对甲状腺滤泡结构改变和淋巴细胞浸润强度进行炎症评分分析，见表11；卵巢组织先于40倍镜下观察，再采集200倍图片，进行各级卵泡计数；子宫组织采集100倍和200倍图像测量子宫腺体直径、子宫腺体面积及子宫内膜厚度。[0068]1.6.4酶联免疫吸附(elisa)法检测各组小鼠血清甲状腺相关指标(tgab、tpoab、tsh、ft3、ft4)、e2、p、amh、vegf、il-2、il-6、5-ht、irision、atp指标。[0069]2、统计学分析[0070]本研究采用spss25.0软件程序对实验数据进行分析处理，所有实验数据检验基本服从正态分布，均采用x±s表示，造模前后的各项指标组内比较采用配对样本t检验；多组组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较时方差齐采用lsd法，方差不齐时采用tamhane’s t2检验，p＜0.05表示有统计学意义。[0071]3、实验结果[0072]在造模过程中，部分小鼠死亡，具体死亡情况如下：1)榆栀药物组小鼠死亡3只：皮下注射导致腹腔出血死亡2只，灌胃后死亡1只(具体原因不明)。2)模型组小鼠死亡4只：皮下注射导致腹腔出血死亡2只，不明原因死亡2只。[0073][0074]3.1各组小鼠一般情况[0075]对照组小鼠一般情况良好且动情周期规律正常；模型组小鼠及榆栀止血颗粒组小鼠因进行多点皮下注射造模，注射部位出现硬结及脱毛，造模结束后仍未消退；造模第8周开始小鼠出现不同程度的颈部、唇周、背部等立毛及脱毛、易怒易激动等情况；榆栀止血颗粒组各种异常情况均有不同程度缓解和改善。[0076]3.1.1各组小鼠的体重及肛温变化[0077]造模前对照组、模型组及榆栀止血颗粒组3组小鼠组间体重无明显差异性(p＞0.05)；与造模前比较，造模后3组小鼠体重均有不同程度的增加，具有统计学意义(p＜0.01)；造模后模型组体重明显比造模后对照组轻，具有显著差异性(p＜0.01)；模型组与榆栀止血颗粒组，对照组与榆栀止血颗粒组造模后体重无明显差异性，无统计学意义(p＞0.05)，(表2)。[0078]造模前各组小鼠组间肛温无明显差异性(p＞0.05)，造模后小鼠肛温与造模前相比较，除对照组外均较前升高，具有统计学意义(p＜0.01)。造模后各组小鼠组间具有显著差异性，具有统计学意义(p＜0.01)；肛温由高到低依次为模型组＞榆栀止血颗粒组＞对照组(表3)。[0079]表2各组小鼠体重统计结果[0080][0081]注：造模前后组内比较:对照组比较p＜0.05，**p＜0.01；模型组比较，#p＜0.05，##p＜0.01；榆栀药物组比较，&p＜0.05，&&p＜0.01；造模后组间比较：对照组与模型组比较，△p＜0.05，△△p＜0.01；与榆栀药物组比较，☆p＜0.05，☆☆p＜0.01；榆栀药物组与模型组比较，◇p＜0.05，◇◇p＜0.01。[0082]表3各组小鼠肛温统计结果[0083][0084]注：造模前后组内比较:对照组比较p＜0.05，**p＜0.01；模型组比较，#p＜0.05，##p＜0.01；榆栀药物组比较，&p＜0.05，&&p＜0.01；造模后组间比较：对照组与模型组比较，△p＜0.05，△△p＜0.01；与榆栀药物组比较，☆p＜0.05，☆☆p＜0.01；榆栀药物组与模型组比较，◇p＜0.05，◇◇p＜0.01。[0085]3.1.2各组小鼠的动情周期变化[0086]模型组小鼠动情周期紊乱率为96.15％，紊乱主要以动情周期延长为主，占比73.07％。榆栀止血颗粒组动情周期紊乱率较模型组降低，其中周期延长紊乱率33.33％，明显低于模型组，见表4。[0087]表4各组小鼠动情周期统计情况[0088][0089][0090]3.2甲状腺、卵巢及子宫组织学观察[0091]3.2.1各组小鼠甲状腺he染色[0092]与对照组甲状腺淋巴细胞浸润强度评分、甲状腺滤泡结构改变评分及甲状腺炎症评分比较，模型组显著升高(p＜0.01)，榆栀止血颗粒组明显升高(p＜0.05)；榆栀止血颗粒组甲状腺淋巴细胞浸润强度评分、甲状腺滤泡结构改变评分及甲状腺炎症评分低于模型组(p＜0.01)(p＜0.01)，见表5，图1。[0093]表5各组小鼠甲状腺病理评分(分，)[0094][0095]注：与对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；与模型组比较，△p＜0.05，△△p＜0.01；模型组与对照组比较，◇p＜0.05，◇◇p＜0.01。[0096]3.2.2各组小鼠的各级卵泡及黄体计数[0097]原始卵泡：模型组原始卵泡数较对照组减少，具有显著差异性(p＜0.01)；榆栀止血颗粒组与模型组比较有显著差异性，榆栀止血颗粒组原始卵泡数明显增多(p＜0.05)。[0098]初级卵泡：模型组初级卵泡数较对照组显著减少(p＜0.01)，榆栀止血颗粒组初级卵泡数较对照组明显减少(p＜0.05)；榆栀止血颗粒组初级卵泡数比模型组增多(p＜0.05)。[0099]次级卵泡：模型组和榆栀止血颗粒组次级卵泡数均比对照组显著减少(p＜0.01)；榆栀止血颗粒组与模型组之间无明显差异性(p＞0.05)。[0100]成熟卵泡数及闭锁卵泡数：各组小鼠成熟卵泡数及闭锁卵泡数组间无明显差异性(p＞0.05)。[0101]黄体：与对照组相比较，模型组黄体数量减少，具有显著差异性(p＜0.01)；榆栀止血颗粒组分别与对照组、模型组比较均无统计学意义(p＞0.05)，见表6，图2。[0102]表6各组小鼠各级卵泡及黄体计数(个，)[0103][0104][0105]注：与对照组比较，p＜0.05，p＜0.01；与模型组比较，△p＜0.05，△△p＜0.01；模型组与对照组比较，◇p＜0.05，◇◇p＜0.01。[0106]3.2.3各组小鼠子宫组织he染色[0107]与对照组相比较，模型组子宫腺体直径及腺体面积均不同程度地增大，内膜厚度出现不同程度增厚(p＜0.01)；榆栀止血颗粒组子宫腺体直径及腺体面积增大，内膜厚度增厚(p＜0.05)。榆栀止血颗粒组较模型组子宫腺体直径及腺体面积明显减小，子宫内膜厚度明显变薄(p＜0.05)，见表7，图3。[0108]表7各组小鼠子宫组织he染色数据分析[0109][0110]注：与对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；与模型组比较，△p＜0.05，△△p＜0.01；模型组与对照组比较，◇p＜0.05，◇◇p＜0.01。[0111]3.3酶联免疫吸附法(elisa)测定小鼠血清[0112]3.3.1小鼠血清甲状腺抗体及甲状腺激素检测[0113](1)tpoab及tgab含量组间对比：模型组小鼠的血清tpoab及tgab含量较对照组明显增加(p＜0.01)；榆栀止血颗粒组小鼠的血清tgab含量显著高于对照组(p＜0.01)；榆栀止血颗粒组血清tpoab及tgab含量显著较模型组降低(p＜0.01)。[0114](2)对照组、模型组及榆栀止血颗粒组3组小鼠组间血清甲状腺激素(tsh、ft3、ft4)含量比较无明显变化(p＞0.05)，见表8。[0115]表8各组小鼠血清甲状腺抗体及甲状腺激素检测[0116][0117]注：与对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；与模型组比较，△p＜0.05，△△p＜0.01；模型组与对照组比较，◇p＜0.05，◇◇p＜0.01。[0118]3.3.2小鼠血清生殖激素检测[0119](1)孕酮(p)含量组间对比：模型组血清p含量显著低于对照组(p＜0.01)；榆栀止血颗粒组血清e2的含量显著高于模型组(p＜0.01)。[0120](2)雌二醇(e2)、抗缪勒管激素(amh)含量组间对比：模型组及榆栀止血颗粒组血清e2、amh含量显著低于对照组(p＜0.01)；榆栀止血颗粒组血清e2、amh含量较模型组显著升高，具有统计学意义(p＜0.01)，见表9。[0121]表9各组小鼠血清生殖激素检测[0122][0123]注：与对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；与模型组比较，△p＜0.05，△△p＜0.01；模型组与对照组比较，◇p＜0.05，◇◇p＜0.01。[0124]3.3.3小鼠血清il-2、il-6、il-2/il-6及vegf检测[0125](1)il-2、il-6及vegf含量组间对比：与对照组比较，模型组和榆栀止血颗粒组血清il-2、il-6及vegf含量显著增高(p＜0.01)；与模型组比较，榆栀止血颗粒组血清il-2、il-6及vegf含量显著降低(p＜0.01)；[0126](2)il-2/il-6组间对比：与对照组比较，模型组il-2/il-6比值显著降低(p＜0.01)，榆栀止血颗粒组il-2/il-6比值无明显差异性(p＞0.05)；与模型组比较，榆栀止血颗粒组il-2/il-6比值降低，具有统计学意义(p＜0.01)，表10。[0127]表10各组小鼠血清il-2、il-6、il-2/il-6及vegf检测[0128][0129]注：与对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；与模型组比较，△p＜0.05，△△p＜0.01；模型组与对照组比较，◇p＜0.05，◇◇p＜0.01。[0130]3.3.4小鼠血清5-ht、irisin及atp检测[0131](1)5-ht含量组间对比：与对照组比较，模型组血清5-ht降低(p＜0.01)，榆栀止血颗粒组无统计学意义(p＞0.05)；榆栀止血颗粒组血清5-ht高于模型组，具有差异性(p＜0.01)。[0132](2)3组小鼠atp、irisin含量无明显差异(p＞0.05)，见表11。[0133]表11各组间小鼠血清5-ht、irisin检测[0134][0135]注：与对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；与模型组比较，△p＜0.05，△△p＜0.01；模型组与对照组比较，◇p＜0.05，◇◇p＜0.01。[0136]3.4各组小鼠合笼产仔数、活胎数[0137]产仔数及活胎数：与对照组比较，模型组及榆栀止血颗粒组产仔数及活胎数均显著降低(p＜0.01)；榆栀止血颗粒组产仔数及活胎数明显多于模型组(p＜0.01)，见表12。[0138]表12各组小鼠合笼产仔数及活胎数及死胎数统计【只，】[0139][0140]注：与对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01；与模型组比较，△p＜0.05，△△p＜0.01；模型组与对照组比较，◇p＜0.05，◇◇p＜0.01。[0141]4、结论[0142]4.1榆栀止血颗粒对桥本氏甲状腺炎模型小鼠一般情况的影响[0143]榆栀止血颗粒组小鼠脱毛立毛、易怒易激动、注射部位硬结及化脓情况较模型组改善；桥本氏甲状腺炎模型雌鼠体重显著轻于对照组(p＜0.01)。造模后肛温：模型组及榆栀止血颗粒组小鼠肛温均较造模前升高(p＜0.01)；各组小鼠组间具有明显差异性(p＜0.01)，肛温由高到低依次为模型组＞榆栀止血颗粒组＞对照组；同时榆栀药物动情周期紊乱率较模型组低，可在一定程度调节小鼠动情周期。[0144]4.2榆栀止血颗粒对桥本氏甲状腺炎模型小鼠甲状腺组织、甲状腺抗体及激素的影响[0145]桥本氏甲状腺炎模型雌鼠具有甲状腺淋巴细胞浸润强度评分、甲状腺滤泡结构改变评分、甲状腺炎症评分、tpoab、tgab显著升高的特点(p＜0.01)。与模型组相比较，榆栀止血颗粒组甲状腺淋巴细胞浸润强度评分、甲状腺滤泡结构改变评分、甲状腺炎症评分、tpoab及tgab含量均显著降低(p＜0.01)；桥本氏甲状腺炎模型雌鼠血清il-2、il-6、vegf含量及il-2/il-6比值均显著升高(p＜0.01)；榆栀止血颗粒能明显降低小鼠血清il-2、il-6、vegf含量及il-2/il-6比值(p＜0.01)说明榆栀止血颗粒能够改善甲状腺炎症，治疗桥本氏甲状腺炎。[0146]4.3榆栀止血颗粒对桥本氏甲状腺炎模型小鼠生殖功能的影响[0147]1)卵巢：桥本氏甲状腺炎模型雌鼠具有各级卵泡数及黄体数降低的特点，甚至部分小鼠出现无卵泡的情况(p＜0.05)；榆栀止血颗粒可改善桥本氏甲状腺炎模型雌鼠的原始卵泡数、初级卵泡数，调节卵巢功能(p＜0.05)。2)子宫：桥本氏甲状腺炎模型雌鼠由于自身免疫炎性反应导致子宫具有内膜增厚、腺体直径及腺体面积增大的特点(p＜0.01)；榆栀止血颗粒可改善模型雌鼠子宫腺体直径、腺体面积及内膜厚度(p＜0.05)。3)性激素水平：桥本氏甲状腺炎模型雌鼠血清p、e2、amh含量水平均显著降低(p＜0.01)，榆栀止血颗粒可上调模型小鼠血清p、e2、amh含量(p＜0.01)。4)子代:榆栀止血颗粒可显著改善桥本氏甲状腺炎模型雌鼠产仔数及活胎数降低的情况(p＜0.05)。说明榆栀止血颗粒能够改善桥本氏甲状腺炎小鼠的生殖功能，增加子代活胎数。[0148]4.4桥本氏甲状腺炎小鼠的证型分析[0149]中医学认为桥本氏甲状腺炎的病位在肝脾肾，由于情志不畅，肝郁气滞，血性不畅而致瘀血，或郁久成火而致木旺克脾，脾失健运，不能运化水湿津液，积聚成痰饮等病理产物；久病则脾不能运化水谷，化生精微物质濡养肾精，而致肾阳亏虚。前期以实证居多，以肝郁气滞、痰火郁结为主；后期久病由实致虚，以肝郁脾虚、脾肾阳虚多为常见。故将5-ht、atp及鸢尾素(irisin)可作为评价肝郁和阳虚证的客观指标。本实验结果显示，与对照组比较，模型组及榆栀药物组的小鼠肛温升高，体重减轻；同时该两组小鼠出现不同程度立毛及脱毛、易怒易激动等情况；模型组及榆栀药物组血清甲状腺抗体(tpoab、tgab)明显升高、5-ht明显降低(p＜0.01)，3组tsh、ft3、ft4、irisin及atp无明显差异，无统计学意义(p＞0.05)；而与模型组比较，榆栀药物组5-ht含量显著升高(p＜0.01)，表明该实验成功制备了肝郁型桥本氏甲状腺炎小鼠模型，且榆栀止血颗粒对了肝郁型桥本氏甲状腺炎小鼠有治疗效果。[0150]实验例2、榆栀止血颗粒对育龄期女性桥本氏甲状腺炎的临床靶向药效研究[0151]1、临床资料[0152]1.1病例来源[0153]选取2020年7月至2021年11月四川省中医院妇科门诊就诊的10例桥本氏甲状腺炎合并不孕症患者，年龄30～44岁，平均(33.7±6.96)岁，病程1.00～6.00年，平均(2.18±1.50)年；本研究已通过医学伦理委员会审批(2019kl-072)。[0154]1.2诊断标准[0155]1.2.1不孕诊断标准[0156]育龄期女性，男女双方性生活正常且规律，未避孕未孕至少1年以上者，可诊断为不孕症。[0157]1.2.2桥本氏甲状腺炎诊断标准[0158]参考2008年4月中华医学会内分泌分会颁发的《中国甲状腺疾病诊治指南》中桥本氏甲状腺炎的诊断标准，(1)甲状腺肿大，质硬，边界清晰，或伴有结节；(2)tpoab或tgab任一血清抗体为阳性，或两者指标均为阳性；(3)多普勒超声学提示腺体变形增大，形状或可伴不规则改变，类“蜂窝样”改变；(4)或前述标准同时伴有亚甲减或甲减。以上4项符合任意一项即可诊断。[0159]1.3纳入标准[0160]1)同时满足桥本氏甲状腺炎合并不孕症诊断要求；2)育龄期女性；3)有独立行为能力者；4)签署知情同意书。[0161]1.4排除标准[0162]有甲状腺手术史；2)子宫次全切术者；3)妊娠期女性；4)伴一过性甲亢、糖尿病、垂体病变等其他内分泌疾病及其他自身免疫性疾病；5)合并肝、肾等严重原发性疾病；6)伴有严重皮肤病者；7)拒绝配合检查及填写相关资料者；受试者具有以上任何1项者不予以纳入。[0163]1.5脱落及剔除标准[0164]1)受试者自行退出观察试验或者受试者依从性差，未按照本研究规定的时间及要求进行检查和服药。2)受试者自行在观察期间服用本研究中明确禁用的药物或者更换治疗方式，对最终研究试验疗效有影响。3)妊娠。[0165]2、研究方法[0166]2.1用药及用药方法[0167]榆栀止血颗粒(山东新时代药业有限公司，生产批号：国家准字z20130019，药物规格10g/袋，每次10g，每日3次，连续治疗1个月。[0168]2.2观察指标及方法[0169]中医体质转化分数、甲状腺抗体指标(tgab、tpoab)、性激素(amh、e2、p)、卵泡数量及子宫内膜厚度。[0170]2.2.1中医体质转化分数计算方法[0171]将治疗前后9种体质转化分数进行比较分析，根据中华中医药学会《中医体质分类与判定》标准进行体质评分，该量表包含平和质、气虚质、气郁质、阴虚质、阳虚质、血瘀质、痰湿质、湿热质及特禀质9种体质亚量表，共计60个条目。所有受试者均根据近1个月个人情况填写纸质体质调查问卷表，医师人员根据所填问卷得出原始分数，将原始分数进行转化，即：转化分数＝(原始分数-条目数)/(条目数×4)×100进行计算，得出体质得分。[0172]2.2.2血清甲状腺抗体及性激素检测方法[0173]治疗前后所有受试者在月经周期的任一时期检查血清tgab、tpoab及amh；要求在黄体中期检查血清性激素e2、p含量[成都中医药大学附属医院甲状腺抗体正常参考值范围：tgab＜2.1，tpoab＜34iu/ml]。[0174]2.2.3卵泡数及子宫内膜厚度检测方法[0175]治疗前后所有受试者按要求在排卵期检测卵泡数及黄体中期检测子宫内膜厚度。[0176]2.3统计学方法[0177]利用红外热成像技术仪器自带的图像测量软件对所有受试者需要观察的区位进行图像截取和温度测量，应用spss 25.0程序软件对红外热成像技术测量的相同区位和相同时间点数据进行录入整理并计算出各组数据的均值和标准差。各区位热值用x表示后应用excel画出趋势图；治疗前后的各项观察数据满足正态分布要求，采用x±s进行描述，组内比较采用配对样本t检验。治疗前后的各观察数据不满足正态分布要求的，采用m(p25，p75)进行描述，采用wilcoxon秩和检验治疗前后相关临床数据指标的差异性，以p＜0.05表示具有统计学意义。[0178]3、结果[0179]本研究初始共计纳入桥本氏甲状腺炎合并不孕症病人51例，未按照要求进行相关检查病例数共28例，未按照规定要求服用药物或中途服用其他药物病例数共13例，最终完成整个研究观察的病例数共10例。[0180]3.1治疗前后9种体质转化分数比较[0181]由表13可知，治疗后的气郁质、阳虚质及血瘀质转化分数均降低(p＜0.05)，治疗前后的阴虚质、痰湿质、湿热质、气虚质、特禀质及平和质转化分数无明显差异性(p＞0.05)。说明本发明能够改善气郁质、阳虚质及血瘀质桥本氏甲状腺炎患者的气郁质、阳虚质及血瘀质体质。[0182]表13治疗前后9种体质转化分数比较(分)[0183][0184]3.2治疗前后甲状腺抗体指标比较[0185]由表14可知，治疗前后tgab、tpoab滴度有差异性，治疗后tgab、tpoab滴度明显降低，具有显著差异性(p＜0.05)，见表1。[0186]表14治疗前后与甲状腺相关指标比较[m(p25,p75)][0187][0188][0189]3.3治疗前后性激素比较[0190]由表15可知，治疗前后血清amh、p含量有差异性，治疗后血清amh含量显著升高(p＜0.05)，p含量明显升高(p＜0.01)；治疗前后血清e2含量比较无统计学意义(p＞0.05)。[0191]表15治疗前后性激素比较[0192][0193]3.4治疗前后卵泡数量及子宫内厚度比较[0194]由表16可知，治疗前后排卵期卵泡数有差异性，治疗后卵泡数明显增加(p＜0.05)；治疗前后黄体中期子宫内膜无明显差异性，不具有统计学意义(p＞0.05)。[0195]表16治疗前后卵泡数量及子宫内厚度比较[0196][0197]4、结论[0198]从上述结果可知，榆栀止血颗粒可有效降低桥本氏甲状腺炎合并不孕症患者的气郁质体质转化分数、阳虚质体质转化分数、血瘀质体质转化分数、tpoab及tgab滴度水平，差异具有统计学意义(p＜0.05)，可上调桥本氏甲状腺炎合并不孕患者的血清amh、p水平(p＜0.05，p＜0.01)，增加卵泡数量(p＜0.05)，对桥本氏甲状腺炎及其并发的生殖功能疾病具有积极的改善治疗作用。[0199]综上，本发明提供了一种药物组合物——榆栀止血颗粒的新用途。榆栀止血颗粒可有效降低气郁质女性桥本氏甲状腺炎患者的tpoab、tgab抗体滴度及气郁质、阳虚质、血瘀质分数，可下调促炎因子(il-2、il-8、vegf)水平，显著减轻甲状腺组织炎症反应，进一步抑制炎症反应对子宫功能的损害，改善桥本氏甲状腺炎并发的生殖功能障碍，在制备治疗桥本氏甲状腺炎及其并发症的药物中具有潜在应用价值。