单胺氧化酶（MAO）特性及测定方法（提供检测试剂盒）

　　单胺氧化酶monoamine oxidase又称单胺:氧氧化还原酶(脱氨)；MAO；E.C.1.4.3.4。单胺氧化酶是一种具有多个结合部位的单一分子酶，对底物的特异性不高，可使多种胺类氧化脱氨。单胺氧化酶含有铜离子，分布在肝、肾等组织的线粒体中，其含量依次为肝、心、肾、脑、肺、骨骼肌，血小板和胎盘中也含有单胺氧化酶。单胺氧化酶参与胶原纤维的生成，因此一些纤维化疾病时该酶往往升高。测定血清中酶活性可以反映其在结缔组织中的活性，从而了解组织纤维化的程度。

　　一、概况

　　1.反应式

　　

　　最适pH值为9.5~9.8(若其pH值幅度超过7~10.5范围，则此酶仅表现出50%的活性)。

　　2.米氏常数

　　

　　3.专一性

　　这类酶对底物的选择性较宽，它能催化氧化伯胺、仲胺与叔胺，色胺衍生物以及儿茶酚胺之类。由人胰脏来源的单胺氧化酶仅作用于伯胺，并发现其反应活性随伯胺的链长增加而相应增高。

　　4.抑制剂

　　肼与重金属离子皆有抑制作用。

　　5.所需纯度

　　此酶在市场上尚未列于试剂供应。

　　6.意义

　　单胺氧化酶广泛分布于各种动物组织中，主要集中于细胞内线粒体的碎片中。患有坏死后的与营养性的肝硬化或迁移性肝癌病人，其血清中此酶水平增高。患急性肝炎病例中，此酶水平未见增高，患纤维性病变时，则此酶水平增高。说明此酶能促使纤维性结缔组织的成熟。

　　二、测定方法

　　1.分光光度法

　　推荐分光光度法测定单胺氧化酶(MAO)，既可依据过氧物酶存在下使过氧化物与邻-联(二)茴香胺反应而生成棕色化合物(入最大为456nm)，也可用比色法测定所生成的氨。然而，大多数文献皆趋向于使用荧光法测定单胺氧化酶，它能检出单个细胞内极其微量的单胺氧化酶。

　　还可以采用单胺氧化酶(MAO)催化单胺类底物脱氨生成相应的醛，进一步氧化成酸，底物在 360nm 处有特征吸收峰，通过测定 360nm处光吸收下降的速率，可计算 MAO 活性。

　　

　　2.荧光法

　　各种方法中最灵敏的方法是以色胺转化为吲哚乙醛的原理，然后再通过与醛脱氢酶(E.C.1.2.1.3)及NAD偶反成哚乙酸；

　　

　　于激发波长280nm与发射波长370nm处测量荧光度，此法测定的灵敏度对于分析各种微量生物组织是行之有效的，适用于各种神经突触与神经节、血管以及不同部位脑组织的分析测定。

　　一种测定NAD的荧光法，此方法适用于各种单胺类底物(包括儿茶酚胺)的测定。

　　发展的荧光法，系采用犬尿胺代替色胺底物，然后，于激发波长315nm或发射波长380nm处测量氧化产物 4-羟基喹啉的含量。

　　一种测定单胺氧化酶(MAO)的灵敏荧光法，即基于MAO催化氧化过程所形成的H2O氧化羟基苯乙酸变成生荧性二聚物。此法对于仅仅10单位的量可检测出。

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